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【產品推介】MSI標準品

原載自：www.mr-eacltd.com[技術資料頻道] 2021-04-01 瀏覽次數：2071

微衛星不穩定性（Microsatellite Instability,MSI），是指由於(yu) 在DNA複製時插入或缺失突變引起的微衛星（Microsatellite,MS）序列長度改變的現象，常由錯配修複功能（Mismatch repair,MMR）缺陷引起。MS序列，是一些短而重複的DNA序列，一般由1~6個(ge) 核苷酸組成，串聯重複排列，常見類型為(wei) 雙堿基CA/GA/GT或單堿基A/T等。MS序列可以位於(yu) 基因的重要非編碼區，也可以位於(yu) 基因的編碼區，多態性分布於(yu) 整個(ge) 基因組，個(ge) 體(ti) 差異大。MSI現象於(yu) 1993年被Jacobs等人在結直腸癌中*發現，與(yu) 癌症發生有關(guan) ，可以用於(yu) 癌症檢測。

MSI檢測方法

MSI常由MMR基因突變及功能缺失導致。因此，在檢測癌細胞中的MSI時，既可以通過檢測MMR基因缺失來確定是否發生MSI，如依賴於(yu) 免疫組化技術的蛋白水平檢測，也可以直接檢測MSI的序列變化，如PCR（聚合酶鏈反應）檢測等的分子水平檢測。

（一）免疫組化方法

免疫組化方法（Immunohistochemistry, IHC）：采用免疫組織化學方法檢測腫瘤組織中錯配修複基因MLH1、MSH2、MSH6及PMS2的表達。任何一項錯配修複基因表達缺失，被定義(yi) 為(wei) MSI，否則即為(wei) 微衛星穩定（MSS）。其中一個(ge) 表達缺失則稱為(wei) 低度微衛星不穩定(MSI-L)，2種或2種以上蛋白表達缺失為(wei) 高度微衛星不穩定(MSI-H)。

（二）分子水平的檢測

1.聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction, PCR)技術
目前主要采用多重熒光PCR結合毛細管電泳的方法。通過PCR方法檢測特異的微衛星重複序列擴增判定MSI狀態，比較腫瘤患者的標本組織與(yu) 正常組織的位點突變情況。其比較的位點為(wei) 美國國家癌症研究所（NCI）推薦的5個(ge) 微衛星位點：BAT25、BAT26、D5S346、D2S123及D17S250。其中≥2個(ge) 位點發生改變判定為(wei) 高度微衛星不穩定（MSI-H），僅(jin) 1個(ge) 位點發生改變判定為(wei) 低度微衛星不穩定（MSI-L），無位點改變判定為(wei) 微衛星穩定（MSS）。有研究認為(wei) ，二核苷酸重複序列的特異性和靈敏度比單核苷酸重複序列要低，因此關(guan) 於(yu) MSI檢測的位點仍存在爭(zheng) 議。Bacher等對266個(ge) 微衛星位點(其中包括單核苷酸、二核苷酸、四核苷酸以及五核苷酸微衛星位點)檢測的敏感性及準確性進行評估，提出了Promega分析係統，該係統使用五個(ge) 單核苷酸微衛星位點(BAT-25, BAT-26, NR-21, NR-24和MONO-27)及兩(liang) 個(ge) 五核苷酸微衛星位點(Penta C和Penta D)檢測MSI。大量的實驗證實，MMR免疫組化檢測結果與(yu) MS的PCR檢測結果有高度關(guan) 聯性，靈敏度92%，特異性可達100%。

2.新一代測序方法（Next Generation Sequencing, NGS）
NGS又稱為(wei) 第二代測序技術，是一種高通量測序技術，能一次性對幾十萬(wan) 到幾百萬(wan) 條基因分子進行序列測定。目前NGS方法已經成為(wei) 檢測MSI的新工具，其優(you) 勢是可以實現多位點高通量檢測。紀念斯隆·凱特琳癌症研究中心（Memorial Sloan Kettering Cancer Center，MSK）的一項研究使用NGS方法對12,288例實體(ti) 瘤病人進行檢測，判定MSI狀態，並用MSI-PCR/MMR-IHC進行了驗證。實驗證明, NGS方法較MSI-PCR方法具有更高的敏感性。

科佰生物可以提供MSI的診斷標準品，保證診斷方法的檢測限、靈敏度、穩定性。