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星空体育官方网站首页的核型分析實驗操作流程分析

原載自:www.mr-eacltd.com[技術資料頻道]  2021-10-12  瀏覽次數:1475

   星空体育官方网站首页是用單細胞分離培養或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。星空体育官方网站首页的特殊性質或標誌必須在整個培養期間始終存在。然而星空体育官方网站首页在體外培養的過程中會出現一些問題,如星空体育官方网站首页無法在培養皿上貼壁生長,星空体育官方网站首页生長緩慢,星空体育官方网站首页死亡等。
  星空体育官方网站首页的核型分析實驗操作研究:
  進行該實驗的所需材料有:姬姆色素染料;秋水仙素;甲醇;冰乙酸;KCL;0.25%胰酶。
  實驗儀器包括顯微鏡、二氧化碳培養箱、水浴鍋、烘箱等。
  具體實驗步驟如下:
  將傳代的細胞密度調整為1*105/ml,接種於1個10cm培養皿,置於37℃,5%CO2培養箱中培養,約培養48小時後,加秋水仙素(終濃度為0.2ug/ml),搖勻後37℃孵育1-2h。
  將培養的細胞用胰酶消化收集到10ml離心管中,1000轉/分,離心10分鍾,去除上清液,留500ul,先將底部細胞吹勻,加入8ml 37℃預溫的0.075M KCL(37℃提前水浴),打勻後放37℃水浴箱40min,加入新鮮配製的固定液(甲醇/冰乙酸=2/1-3/1)2ml地混勻,室溫下放10min後,1000轉/分離心10min,去上清液,留500ul,先將底部細胞吹勻,新加入8ml固定液,離心清洗、重複三次後、滴片,放入60℃烘箱老化6小時(過夜);再將烤幹的玻片放入胰酶(0.25%)中消化1min左右後,再放入吉姆薩染液中染色5-6min,取出用流水衝去染液後,在顯微鏡下觀察結果。
  相關實驗注意事項:
  1.滴片的載玻片需預先泡酸處理;
  2.低滲溶液要用無菌水配製;
  3.低滲溶液,胰酶需要提前預熱;
  4.固定液、胰酶、吉姆薩染色液需現配現用。

 

 

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