【產品推介】IL12細胞篩選模型

IL-12介紹

1989年，白細胞介素-12（IL-12）從(cong) EB病毒轉化的B淋巴細胞上清液中被鑒定出來，當加入人外周血淋巴細胞時，因其能誘導幹擾素（IFN）-γ和自然殺傷(shang) （NK）介導的細胞毒性而被命名為(wei) “自然殺傷(shang) 刺激因子"。這種促炎症的異源二聚體(ti) 細胞因子由共價(jia) 連接的p40和p35亞(ya) 基組成，是IL-12細胞因子家族中的一員，該家族還包括IL-23、IL-27、IL-35和IL-39等因子。IL-12和IL-23都是複合型細胞因子，有一個(ge) 共同的IL-12 p40亞(ya) 基並共用IL-12Rβ1受體(ti) ，而其因子特異性則主要由IL-12 p35亞(ya) 基以及IL-23p19亞(ya) 基分別與(yu) IL-12Rβ2受體(ti) 以及IL-23R受體(ti) 結合而得到區分。p35和p40基因都需要在同一個(ge) 細胞內(nei) 表達並形成具有活性的異源二聚體(ti) 並隨後介導IL-12通路信號的產(chan) 生。

吞噬細胞和樹突狀細胞受到細菌和微生物刺激後會(hui) 分泌產(chan) 生IL-12，伴隨抗原呈遞，IL-12誘導CD4+T細胞分化為(wei) 產(chan) 生IFN-γ的輔助性T細胞1（Th1）以及誘導淋巴因子激活的殺傷(shang) 細胞和NK細胞。這些Th1細胞對細胞內(nei) 病原體(ti) 微生物（如嗜肺軍(jun) 團菌、結核分枝杆菌、單核細胞增生李斯特菌和沙門氏菌屬等）產(chan) 生反應和促進滯發性超敏反應和巨噬細胞活化。

NK、B和T細胞是主要的表達IL-12受體(ti) 的細胞，IL-12介導的信號通過將酪氨酸激酶TYK2和JAK2分別招募到IL-12Rβ1以及IL-12Rβ2來啟動信號傳(chuan) 遞，隨後這些激酶會(hui) 進一步磷酸化並激活下遊的轉錄因子STAT4， 隨後STAT4複合物轉移到細胞核，與(yu) Jun癌基因（c-Jun）一起，與(yu) IFN-γ啟動子結合，導致IFN-γ轉錄和Th1分化。此外，IL-12相關(guan) 的IFN-γ產(chan) 生會(hui) 進一步誘導趨化因子CXCL10的產(chan) 生，進而抗血管生成。

IL-12與(yu) 免疫類疾病的相關(guan) 性及藥物開發

在體(ti) 內(nei) 中，IL-12和IL-23由組織中的樹突狀細胞和巨噬細胞等“預警細胞"生成。在IL-12和IL-27的共同作用下CD4+ 輔助T細胞（Th）會(hui) 分化為(wei) 表達幹擾素γ（IFNγ）的Th1細胞。而IL-23會(hui) 與(yu) 其它細胞因子共同作用，促使CD4+ Th細胞分化為(wei) Th17細胞，同時刺激Th17細胞分泌IL-17家族細胞因子，這些因子具有促炎症的作用。

急性炎症反應是身體(ti) 對抗外來病原體(ti) 入侵所產(chan) 生的反應，然而當體(ti) 內(nei) 炎症相關(guan) 細胞因子的水平失衡時，會(hui) 引發炎症持續發生，導致風濕性關(guan) 節炎、炎症性腸病（IBD，通常包括克羅恩病和潰瘍性腸炎）、脊柱關(guan) 節炎（SpA）和銀屑病等慢性免疫類疾病。由於(yu) IL-12、IL-23/IL-17信號通路在釋放促炎症細胞因子方麵的重要作用，這一信號通路也成為(wei) 開發治療慢性炎症疾病的熱門靶標，催生了多款重磅藥物和在研療法。

由強生開發的Ustekinumab是一款針對IL-12和IL-23的抗體(ti) 拮抗劑，它可以特異性的結合白細胞介素IL-12和IL-23的p40蛋白亞(ya) 單位，通過同時抑製IL-12和IL-23相關(guan) 信號通路來達到治療慢性炎症相關(guan) 的免疫類疾病。該藥自上市以來，已獲批中重度斑塊狀銀屑病、活動性銀屑病關(guan) 節炎、中重度活動性克羅恩病以及中重度活動性潰瘍性結腸炎等多個(ge) 相關(guan) 適應症。在國內(nei) ，康方生物自主開發的抗IL-12/IL-23單克隆抗體(ti) 注射液AK101 也屬於(yu) 同類產(chan) 品，該藥物目前處於(yu) 臨(lin) 床實驗階段，開展了針對中重度斑塊狀銀屑病、中重度潰瘍性結腸炎、係統性紅斑狼瘡適應症等多個(ge) 臨(lin) 床研究。

IL-12與(yu) 腫瘤免疫的相關(guan) 性及藥物開發

多項研究表明，IL-12可以通過多種免疫調節機製發揮抗腫瘤的作用，其作用機製主要有：

1）通過調節T細胞介導細胞免疫發揮抗腫瘤作用；

2）通過誘生IFN-γ介導抗腫瘤效應；

3）通過抑製血管生成發揮抗腫瘤作用。已有的數據表明修飾過的IL-12或人工合成的IL-12激動劑與(yu) PD-1&PD-L1, CTLA4等免疫檢查點抑製劑聯用可產(chan) 生協同效應，增強藥物的抗腫瘤作用。以IL-12為(wei) 靶點，開發腫瘤免疫相關(guan) 療法的多項臨(lin) 床研究也正在進行中。（如下表所示）

針對IL-12藥物的研發，科佰生物開發了相關(guan) 細胞篩選模型，可用於(yu) 細胞水平篩選IL-12激動劑或拮抗劑活性。

部分產(chan) 品數據

IL12 Effector Reporter cell CBP74134

Figure 1. Dose Response of Recombinant Human IL12 in Human IL12 Effector Reporter Cells (C2).

Figure 2. Inhibition of IL12-induced Reporter Activity by IL-12/IL -23 p40 Neutralizing Antibody in IL12 Effector Reporter Cells (Clone2).