BTK細胞篩選模型

B細胞受體(ti) （BCR）信號通路在成熟B細胞惡性腫瘤的發生和進展中起著核心作用，例如慢性淋巴細胞白血病（CLL）、套細胞淋巴瘤（MCL）、彌漫性大B細胞淋巴瘤（DLBCL）、濾泡性淋巴瘤（FL）或華氏巨球蛋白血症（WM）。BCR信號通路中的激活突變常見於(yu) DLBCL、FL或WM；而在CLL和MCL中一般會(hui) 缺失，但BCR信號轉導被組成性激活，並且是其發病機製的關(guan) 鍵參與(yu) 者。

細胞表麵免疫球蛋白本身不具有任何激酶活性。它與(yu) 二硫化物連接的異二聚體(ti) Igα和Igβ（CD79A， CD79B）非共價(jia) 連接。經過識別和抗原結合後，BCR開始聚集並改變其構象，造成Igα和Igβ細胞質結構域上酪氨酸的激活基序（ITAM）的磷酸化。這種磷酸化由Src家族激酶LYN介導，為(wei) 脾酪氨酸激酶（SYK）創造了一個(ge) 對接位點。然後，活化的SYK磷酸化B細胞接頭蛋白（BLNK），BLNK是一種有助於(yu) 募集其他分子（如布魯頓酪氨酸激酶（BTK））的接頭蛋白。BCR刺激還導致LYN和SYK磷酸化共受體(ti) CD19和PI3K銜接蛋白 BCAP，然後激活磷酸肌醇 3-激酶（PI3K），導致PIP3產(chan) 生。

Figure 1：BCR信號通路

布魯頓酪氨酸激酶（BTK）是BCR通路的關(guan) 鍵酶之一。BCR信號啟動後，BTK磷酸化並激活磷脂酶Cγ2 （PLCγ2），進而激活NF-κB。BTK突變最初是在x連鎖無丙種球蛋白血症（XLA）患者中發現的。BTK在CLL、MCL、DLBCL和其他類型淋巴瘤中的進一步研究使其成為(wei) 治療癌症的有利靶點。此外，BTK已被證明在toll樣受體(ti) 介導的感染因子識別和Fc受體(ti) 信號傳(chuan) 導中起作用。其中，Fc受體(ti) 信號在BTK信號傳(chuan) 導中尤為(wei) 重要。肥大細胞、嗜堿性細胞、單核細胞、巨噬細胞等免疫細胞在炎症和過敏反應中發揮重要作用，這些炎症和過敏反應是由高親(qin) 和力IgE受體(ti) （FcεRI）交聯引起的，激活細胞內(nei) 信號通路，導致脫顆粒和釋放組胺和其他促炎細胞因子。因此，自身免疫條件下的組成型BTK激活導致FcεRI的激活。除此之外，免疫細胞如巨噬細胞上的Fcγ受體(ti) （FcγR）也在腫瘤特異性抗體(ti) 介導的涉及BTK的免疫應答中發揮重要作用。BTK還被發現是NLRP3炎性體(ti) 的直接調節劑。

2013年，第一代BTK抑製劑Ibrutinib（伊布替尼）已被批準用於(yu) 治療 CLL、MCL、WM 和邊緣區淋巴瘤 （MZL），它與(yu) BTK活性位點的半胱氨酸殘基形成共價(jia) 鍵，封閉了ATP結合口袋，從(cong) 而阻斷BTK的酶活性。雖然它是一種強效藥物，但它存在脫靶效應，並且相當多的患者對治療產(chan) 生耐藥性或毒性而停止治療。第二代的BTK抑製劑（如Acalabrutinib等）在保持高選擇性的同時，減少了脫靶效應，提高了安全性和療效。但第一代和第二代的抑製劑都屬於(yu) 不可逆抑製劑。BTK共價(jia) 抑製劑治療後常會(hui) 產(chan) 生耐藥，部分耐藥機製為(wei) BTK 基因產(chan) 生耐藥突變導致，其中最常見的耐藥突變為(wei) C481位的氨基酸突變為(wei) S。Pirtobrutinib是由禮來研發的獲批上市的非共價(jia) 的第三代BTK抑製劑，它通過非共價(jia) 、非C481依賴的結合阻斷BTK的ATP結合位點，從(cong) 而克服由C481S導致的共價(jia) BTK抑製劑耐藥機製，另外包括fenebrutinib，Nemtabrutinib等也屬於(yu) 同一類型的三代非共價(jia) 抑製劑。除了上述共價(jia) 或非共價(jia) BTK抑製劑外，為(wei) 了進一步提高藥效和克服耐藥，近年來一些藥企也在開發針對BTK靶點的PROTAC藥物，下表為(wei) 部分在研的BTK抑製劑以及PROTAC藥物。