篩選ATCC星空体育官方网站首页主要由三類方法-星空体育官方网站登录入口
加入收藏 | 設為首頁 | 聯係我們

產品搜索

聯係我們

聯係人:蔣經理
電話:4008750250
手機:18066071954
地址:南京市棲霞區緯地路9號
Email: zhangxiangwen@cobioer.com

新聞動態 / news
當前位置:首頁 > 新聞動態 > 篩選ATCC星空体育官方网站首页主要由三類方法

篩選ATCC星空体育官方网站首页主要由三類方法

原載自:www.mr-eacltd.com[行情動態]  2018-09-13  瀏覽次數:1733

  ATCC星空体育官方网站首页作為科研工作者常用的工具,主要用於生物醫學研究的體外實驗研究。截止目前,被ATCC、JCRB、RIKEN、DSMZ*數據庫收錄的商用ATCC星空体育官方网站首页約為4000種左右。近年來,隨著ATCC星空体育官方网站首页的廣泛應用,ATCC星空体育官方网站首页被錯誤鑒定和交叉汙染問題顯得尤為突出。為了確保實驗結果的可重複性,NIH和ATCC早年對此已發出呼籲,建議研究者對ATCC星空体育官方网站首页進行鑒定,以明確所使用細胞的身份。多種主流雜誌也紛紛要求作者在投稿時提交ATCC星空体育官方网站首页鑒定報告,有些雜誌甚至要求作者提供實驗前、實驗中和實驗後等不同階段的ATCC星空体育官方网站首页鑒定報告。
  篩選ATCC星空体育官方网站首页的方法主要有哪些?
  主要有三類方法:
  1)單克隆環法:此類方法多用於整合率低的轉染方法或者需要得到單克隆ATCC星空体育官方网站首页的實驗。其優點在於工作量小,隻需將轉染或者病毒載體感染後的細胞按照一定的細胞密度轉移至新皿中,並使用合適的藥物進行篩選,後在克隆環的幫助下對單克隆ATCC星空体育官方网站首页進行挑選,並在新皿中完成擴增。缺點在於需要對細胞密度和藥物濃度繪製致死曲線並選取合適的細胞密度和藥物濃度進行篩選,一些細小的密度和濃度差別都會導致難以獲取均一的單克隆,結果導致獲取的克隆不純,含有非整合的細胞。穩定整合的細胞在這樣一類混合細胞中,很快會失去生長優勢,終導致失去穩定株。 2)96孔單克隆稀釋法:此類方法同樣多用於整合率低的轉染方法或者需要得到單克隆ATCC星空体育官方网站首页以及篩選懸浮細胞穩定株的實驗。其優點在於,理論上可以得到非常均一的單克隆,同時可以篩選懸浮細胞穩定株。其缺點在於,工作量比較大。
  3)逆轉錄病毒混合克隆製備法:此類方法適用於需要製備混合穩定株。優點在於可以在短時間內(1周)獲得穩定ATCC星空体育官方网站首页,同時也可以隨時將細胞稀釋轉移至新皿中獲得單克隆ATCC星空体育官方网站首页。缺點在於需要製備逆轉錄病毒載體。
  ATCC星空体育官方网站首页需要具備在不同的時間,不同的場地以及不同的批次間生產相同質量產品的能力。在選定生產用ATCC星空体育官方网站首页之後,需要建立主細胞庫(mater cell bank)。從主細胞庫複蘇後,擴增建立工作細胞庫(working cell bank),工作細胞庫用於生產。細胞庫通常保存在液氮中,需要維持整個產品的生命周期。在構建生產用ATCC星空体育官方网站首页的過程中,宿主細胞和表達載體至關重要。

 

推薦收藏該企業網站
51La