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新聞動態 / news
中科院細胞所分享細胞的計數步驟
原載自:www.mr-eacltd.com[行情動態] 2019-09-13 瀏覽次數:2096
中科院細胞所分享細胞的計數步驟
當待測細胞懸液中細胞均勻分布時,通過測定一定體積懸液中的細胞的數目,即可換算出每毫升細胞懸液中細胞的細胞數目。具體步驟如下:
1.將細胞製成細胞懸液;
2.將蓋玻片放在血細胞計數板的2個小室上;
3.吸取少許細胞懸液輕輕注入蓋玻片邊緣與計數板交界處;
4.100倍鏡下,用計數器計數每個小室的中央和四角的方格中的細胞;
5.隻計數壓左邊中線和上邊中線的細胞;
6.分別用雙蒸水和75%酒精清洗計數板、蓋玻片,並擦幹。
細胞計數的幾大要點:
1.進行細胞計數時,要求懸液中細胞數目不低於1×107 L-1,如果細胞數目很少要進行離心再懸浮於少量培養液中;
2.要求細胞懸液中的細胞分散良好,否則影響計數準確性;
3.取樣計數前,應充分混勻細胞懸液,尤其時多次取樣計數時更要注意每次取樣都要混勻,以求計數準確;
4.數細胞的原則是隻數完整的細胞,若細胞聚集成團時,隻按照1個細胞計算。如果細胞壓在格線上時,則隻計上線,不計下線,隻計右線,不計左線;
5.操作時,注意蓋片下不能有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中,否則要重新計數。
其中,初學者易犯的錯誤是計數前未將待測懸液吹打均勻。滴入細胞懸液時蓋玻片下出現氣泡。滴入懸液時的量太多,至使細胞懸液流入旁邊的槽中。