人結腸癌星空体育官方网站首页前期需要準備

　　人結腸癌星空体育官方网站首页的複蘇,遵守慢凍快融的原則。先將水浴鍋調至37-37.5度，取出凍存的細胞迅速放入後將細胞麵浸至水麵以下不斷搖動至融化。在無菌台內將*培養基加入50ml的小培養瓶內，約5ml左右，然後用無菌吸管從凍存管內取出細胞，置培養並內輕輕搖晃，使細胞均勻後置培養箱內培養。
　　人結腸癌星空体育官方网站首页前期需要準備：
　　1.構建好的外源基因載體
　　2.待轉染的細胞係（1×106個細胞，可傳代，倍增時間小於48小時）以及細胞培養條件的說明
　　3.若需要檢測靶基因的表達變化，請提供相應抗體
　　收到人結腸癌星空体育官方网站首页後，取出培養瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。
　　（一）如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒後放到超菌台內，嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶，吸出培養液，僅留下10ml培養液在瓶內繼續培養。
　　(二)如果細胞已長滿，即可進行傳代培養。具體步驟如下：
　　1. 棄去培養液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。
　　2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶中，倒轉放於37度培養箱1-3分鍾預熱，然後又將培養瓶倒轉大約30秒後，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養培養瓶，細胞隨即脫落下來。
　　3. 加入6-8ml*培養基，吸出，分到新的培養瓶中。一傳二。
　　人結腸癌星空体育官方网站首页實驗要點及說明：
　　1．本方法適用於貼壁細胞培養，而不適用於懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
　　2．所使用的蓋玻片應該為玻璃製造，並經過鉻酸洗液處理；
　　3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
　　4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加汙染機率；
　　5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。