HCoV-229E和HCoV-OC43都是在1960年代發現的，多年來一直被*為(wei) 引起普通感冒的原因，並在一生中引起頻繁的再感染。在成年人中，這些病毒每年占急性呼吸道疾病的 4％至15％，在高峰期高達35％。兒(er) 童的年發病率達到8％，發病率高達20％。據報道，成人中229E和OC43病毒的感染頻率為(wei) 每年每100人15至25人不等，其中有80％的感染者是先前具有該感染病毒抗體(ti) 的人。

NCBI收錄序列為(wei) KX344031.1，全長30713bp，基因編碼5個(ge) 結構蛋白：S，M，N，HE和E。

• S蛋白（spike protein）穿過病毒膜，並在冠狀病毒“冠狀”中形成特征性的尖峰。它被高度糖基化，可能形成同源三聚體，並介導受體結合和與宿主細胞膜融合。刺激中和抗體的主要抗原以及細胞毒性淋巴細胞的重要靶標在S蛋白上。
• M蛋白（membrane glycoprotein）具有一個短的N末端結構域，該結構域在包膜的外表麵上突出並跨過該包膜3次，在包膜內留有一個長的C末端。M蛋白在病毒裝配中起重要作用。
• 核衣殼蛋白N（nucleocapsid phosphoprotein）與RNA基因組結合形成核衣殼。它可能參與病毒RNA合成的調控，並可能在病毒出芽過程中與M蛋白相互作用。
• HCoV-OC43中發現血凝素酯酶糖蛋白（HE）。血凝素部分與宿主細胞表麵的神經氨酸結合，可能使病毒初吸附到膜上。酯酶從神經氨酸裂解乙酰基。冠狀病毒的HE基因與C型流感HE糖蛋白具有序列同源性，可能反映了這兩種病毒之間的早期重組。
• 小包膜E（envelope protein）蛋白將其C末端留在包膜內，然後跨越該包膜或彎曲並在內部投射其N末端。

根據CDC和WHO的介紹，針對HCoV-OC43的核酸診斷一般是針對RdRP (RNA-dependent RNA polymerase)、Gene N和Gene E， Gene S更多用於(yu) 對應藥物和疫苗的開發。

以往針對試劑盒檢測限的性能評價(jia) ，一般是選擇體(ti) 外轉錄的RNA、或者臨(lin) 床陽性病毒來作為(wei) 標準品，用於(yu) 性能評價(jia) 。但是兩(liang) 者都具有很明顯的確定，首先體(ti) 外轉錄的RNA，一般是很純，單一，不涉及提取，不符合臨(lin) 床病毒的微環境，因此必然造成檢測靈敏度被高估，這也是存在高概率假陰性的主要原因；再次臨(lin) 床陽性病毒，即使是滅活的病毒，也是存在很大的生物安全隱患，因此要求實驗室級別為(wei) P3-P4，大部分開發診斷試劑盒單位都不滿足改要求，另外臨(lin) 床陽性病毒也是來源很有限，不能被穩定供應，反複用於(yu) 試劑盒的性能評價(jia) 。

因此，有病毒的完整包膜結構，有HCoV-OC43對應的核酸序列，但是生物安全風險較低的假病毒標準品，完美的克服了如上的缺點，非常適合用於(yu) 核酸診斷性能評價(jia) 的標準品。

科佰生物開發了基於(yu) NCBI公布序列的假病毒產(chan) 品，用於(yu) 各診斷試劑盒的性能評價(jia) ，其對應的優(you) 點如下：

1. hCov-OC43-E 假病毒標準品，區別於以往體外合成的RNA、臨床陽性活病毒，完美克服兩者的缺點，真正適合用於試劑盒的性能評價，包含檢測限、特異性，重複性等；
2. 根據HCoV-OC43冠狀病毒的特點，選取了RdRp(RNA-dependent RNA polymerase)、Gene E(envelope protein)、Gene N(nucleocapsid phosphoprotein)合計3個區段的序列，用於假病毒的包裝，3個區段很好的表征了HCoV-OC43的特征序列；
3. 科佰生物設計了ddPCR體係的引物、探針序列，可不需要構建標準曲線的前提下完成對假病毒的QC拷貝數檢測，非常準確表征標準品的拷貝數，而且克服了Q-PCR分析CT值的相對判斷標準的不準確性；
4. hCov-OC43-E 假病毒標準品，無致病性，可再生，質控方法可靠，批次間穩定，可以長期穩定製備和供應，而且要求實驗室生物安全級別為P2，滿足很多單位的安全需求。