棘皮微管相關(guan) 蛋白（Echinoderm microtubule-associated protein，EMAP）在海膽中表達， 是第一個(ge) 被鑒定的 EMAP 樣蛋白(EML)家族成員。它是海膽卵微管（MT）製劑的主要成分， 也被發現在間期和有絲(si) 分裂時與(yu) 微管蛋白共定位。

      ALK 是胰島素受體(ti) 超家族的一員，在間變性大細胞淋巴瘤中通過與(yu) 核磷蛋白 （NPM）融合發現。癌細胞中的 ALK 信號傳(chuan) 導通過三種主要機製發生：基因融合、基因 擴增和點突變。

      在肺癌中檢測到的第一個(ge) 致癌融合是 EML4-ALK，由 2 號染色體(ti) 短臂上的一個(ge) 小倒位 產(chan) 生，促進 EML4 N 末端與(yu) ALK（外顯子 20）的融合。一旦 EML4 中的斷點出現在不同 的外顯子（2、6、13、14、15、18 和 20）中，EML4-ALK 融合蛋白就會(hui) 呈現多種變體(ti) 。 其中 EML4-ALK 融合中最常見的變體(ti) 亞(ya) 型為(wei) V1 和 V3a/b，約占所有 EML4-ALK 融合突變 的 70%。不同 EML4-ALK 變體(ti) 的表達可能會(hui) 影響對 ALK TKI 的反應，從(cong) 而影響繼發性耐 藥特異性 ALK 突變的發展傾(qing) 向。EML4 與(yu) ALK 激酶結構域的融合導致異常信號傳(chuan) 導，從(cong) 而增加細胞生長、增殖和細胞存活。在 NSCLC 患者的 ALK 中檢測到的點突變約占觀察到 的耐藥機製的三分之一，其中最常見的是 p.L1196M（類似於(yu) EGFR 的 p.T790M）。其他確 定的突變有 p.1151Tins、p.L1152R、p.C1156Y、p.I1171T、p.F1174L、p.V1180L、p.G1202R、 p.D1203N、p.S1206Y 和 p.G1269A 。這些突變增加了激酶受體(ti) 與(yu) ATP 的親(qin) 和力，降 低了 TKI 的結合親(qin) 和力。ALK 基因突變，例如 p.1151Tins 和 p.G1202R，導致對第二代 ALK TKI 產(chan) 生耐藥性；p.L1196M 和 p.L1152R 賦予對第二代和第三代 ALK TKI 的敏感性； p.G1202R 導致對第一代和第二代 ALK TKI 產(chan) 生耐藥性。

      BaF3（小鼠原 B 細胞）的生長和增殖需要 IL-3 的維持。通過引入各種表達激酶的基因， 能作為(wei) BaF3 的驅動基因，讓 BaF3 不再依賴 IL-3 而增殖，進而激酶基因成為(wei) BaF3 增殖依 賴的驅動基因，用於(yu) 評估小分子藥物對激酶的靶向抑製作用，原理及流程見下圖所示。
 

Figure 1. EML4-ALK V3a BaF3 細胞的構建原理圖

1. Sanger of EML4-ALK V3a/BaF3

Figure 2. Sanger of EML4-ALK V3a/BaF3

2. Anti-proliferation assay

Figure 3. CTG Proliferation Assay of EML4-ALK V3a BaF3(C1).