細胞信息：

WiDr人結腸癌細胞，直接來源於(yu) ATCC，公司海外直接購買(mai) ，未經代理，細胞真實。購買(mai) 到貨後，由我們(men) 實驗室擴增、凍存，凍存的產(chan) 品全部經過QC檢測，進口來源，質量保證5代以內(nei) ，活力>95%，無細菌、真菌、支原體(ti) 汙染。

細胞到達客戶手中，1個(ge) 月內(nei) 出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們(men) 公司都可以免費再向客戶提供一次。對細胞的真實性，支持客戶鑒定STR或者基因突變測序數據，如證明細胞錯誤，全額退款。

產(chan) 品形式：

公司提供2種形式的產(chan) 品：

1種是凍存產(chan) 品，由液氮直接拿出，幹冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為(wei) 複蘇手法對於(yu) 細胞狀態影響較大，一旦細胞狀態不好，很難說是細胞自身不行，還是複蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態影響很大，-80C也不是細胞儲(chu) 存的方式，快遞時間也很難控製，多種因素影響產(chan) 品的質量；再者幹冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐(feng) )。

第2種是我們(men) 複蘇好細胞，QC通過後，T-25灌滿培養(yang) 基常溫運輸給客戶，排除複蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，隻需加25元運費(順豐(feng) )。

默認是發第2種，如果想要1種，需事先告知。

購買(mai) 流程：

1.客戶確定訂購；

2.公司將合同發給客戶簽字（電子版或者紙質版），同時快遞發票給客戶；

3.由客戶報銷費用到公司賬戶。

4.報賬過程中，我公司將複蘇細胞，做QC。

5.QC通過，同時費用到賬，即可發貨給客戶（順豐(feng) ）。

WiDr人結腸癌細胞 培養(yang) 注意事項：

1.收到細胞後，請將培養(yang) 瓶放入37度培養(yang) 箱，放置4小時，使細胞回到正常溫度。

2.將培養(yang) 瓶內(nei) 培養(yang) 基用移液管吸到另一無菌瓶內(nei) ，培養(yang) 瓶內(nei) 保留5-6ml培養(yang) 基繼續培養(yang) 至少24小時方可傳(chuan) 代，吸出的培養(yang) 基4度保存（如吸出培養(yang) 基有較多碎片，3000轉離心10分鍾，取上清保存），用於(yu) 後續培養(yang) 。強烈建議您使用吸出培養(yang) 基培養(yang) 至少2-3代，並在更換新培養(yang) 基前凍存幾支細胞。

3.如有Greiner細胞培養(yang) 瓶，可取一個(ge) 新的T25 flask，取其瓶蓋，更換原培養(yang) 瓶的瓶蓋。如使用原瓶蓋，則需要稍稍擰鬆瓶蓋，使氣體(ti) 能夠進入。

4.37度培養(yang) 至少24小時，當細胞密度符合傳(chuan) 代要求時，PBS清洗細胞，加入1ml胰酶，消化細胞傳(chuan) 代。當80%以上細胞培養(yang) 瓶輕輕晃動能脫落時，加培養(yang) 基終止消化，吹打成單細胞，吸入15ml離心管，1000轉離心5分鍾。

5.離心後棄上清，加入新培養(yang) 基吹打重懸細胞成單細胞，加入新的培養(yang) 瓶中繼續培養(yang) 。

6.用吸出培養(yang) 基傳(chuan) 2-3代後請及時凍存細胞。

貼壁細胞凍存方法:

每個(ge) T75 或10cm培養(yang) 皿的細胞消化離心後棄上清。加2ml細胞凍存液(90% FBS+10%DMSO),吹打均勻, 加入2個(ge) 細胞凍存管。立即放入細胞凍存盒（Nalgene 5100-0001），加異丙醇到刻度線，放-80度冰箱。24小時後將凍存管轉到液氮中長期保存。